免疫组化

免疫组化是应用抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂显色来对组织细胞内抗原进行定位、定性及相对定量的研究。

石蜡切片的免疫组化染色

抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性，免疫组织化学正是利用了这一原理。由于抗原与抗体的复合物是无色的，因此还必须借助于组织化学的方法将抗原抗体结合的部位显示出来，以期达到对组织或细胞中的目标抗原进行定性，定位或定量的研究。

实验流程

1.石蜡切片脱蜡。

2.抗原修复。

3.千分之一曲拉通破膜，PBS洗5min*3。

4.内源性过氧化物酶阻断剂室温30min，如3%过氧化氢。

5.封闭液室温1h，倾去血清，勿洗。滴加一抗工作液，4 ℃ 过夜。

6.PBS洗5min*3，滴加适量生物素标记二抗工作液，室温1h，PBS洗5min*3。

7.滴加适量的辣根酶或碱性磷酸酶标记的链霉卵白素工作液，室温30min，PBS洗5min*3。

8.DAB显色剂显色数秒，勿显色过久。

9.自来水充分冲洗，苏木素染核，脱水，封片。