油红染色

简介：油红o脂肪染色法通常应用于检测组织或细胞内的脂肪情况，油性红o（Oil Red o）是一种脂溶性染料，是很强的脂溶剂和染脂剂，在脂肪内能高度溶解。

原理：其染色原理是油红o能特异性地与组织和细胞内的中性甘油三脂、脂质以及脂蛋白产生吸附作用从而使脂肪染色。染料在胞内脂质中的溶解度较溶液更大，当染料加入组织切片时，染料从有机溶剂转移而溶于组织内的脂质中，使组织内的脂肪呈红色。

步骤：1）试剂准备：油红o母液：1g油红o粉末溶解在100 mL异丙醇中(异丙醇易挥发，注意密闭避光，常温放置即可)。充分溶解之后仍会出现很多沉淀。

油红O工作液：油红O母液（静置后的上清）与双蒸水3:2稀释，2000 rpm离心5 min，可以吸出上清备用。

60%异丙醇：异丙醇与双蒸水3:2稀释。

2）4% PFA 固定细胞10 min，PBS漂洗2-3次；

3）60%异丙醇浸润15-30 s（目的是使细胞表面被有机溶剂覆盖，使染料更好的进入细胞着色）；

4）油红O工作液染色10 min左右（注意避光），PBS清洗细胞后吸出，加无水乙醇浸润15-30s；

5）拍照。